2000年,出演电视剧及舞台剧《男亲女爱》,饰梅日
2001年,与陈浩民、叶璇搭档主演神话剧《封神榜》,饰殷十娘。
2005年,在电视处境喜剧《窈窕熟女》中饰李真真。
2006年9月,出演现代轻喜剧《高朋满座》,饰高丽。
2007年8月,在方中信主演的《建筑有情天》中苑琼丹出演钟国美一角。
2009年3月,出演了王晶执导的古装喜剧《大内密探灵灵狗》,饰林美人;4月,主演由邝业生执导的古装轻喜剧《刁蛮娇妻苏小妹》,出演柳月娥一角;10月,出演贺岁喜剧《财神到》。
2010年1月,出演古装轻喜剧《欢喜婆婆俏媳妇》,饰演光绪皇帝的表姐“马玲珑”;4月,在导演王宁执导并编剧的爱情喜剧电影《爱情维修站》中饰张燕;5月,参与陈锦鸿主演的古装谐趣系列剧《妹仔大过主人婆》,苑琼丹扮演阿转;6月,主演清装涉案轻喜剧《审死官》,并扮演潘巧云;7月,出演时装电视剧《情越双白线》,并凭借陈笑芬一角获得了2010年TVB台庆最佳女配角的提名;9月,搭档郑则仕主演“80后”爱情励志剧《爱情可以有》,饰演傅阿姨;10月,参与秦子越、秦昊、徐娇主演的喜剧动作魔幻片《玩命时光》,饰婆婆;11月,主演年代剧《百媚千娇》,出演宋喜娘;同年,参与侦探查案剧《囧探查过界》的拍摄。
2011年3月29日,出演悬疑搞笑武打电视剧《七品芝麻官》,饰吴笑娥;4月14日,在青春惊悚电影《夜店诡谈》里特别客串护士长;8月7日,获得乐视影视盛典年度最具实力女演员获奖;7月13日,客串爱情情景喜剧《爱情公寓3》,在剧中饰演胡一菲的妈妈;8月,出演青春都市情感剧《亲爱的,回家》,饰安母。
2012年1月16日,出演都市情感戏《金玉满堂》,饰刘氏家族第二代传人叶霜;4月7日,在时尚探案剧《新神探联盟》中饰演宫洁;4月25日,参演原生态喜剧电影《左眼不跳财》饰母亲;10月12日,主演古装电视剧《紫钗奇缘》,饰宁国公主;10月23日,在于正执导的《宫锁沉香》中饰掌事姑姑;12月30日,与小沈阳、叶璇、胡静搭档主演都市婚恋求生指南《抓紧时间爱》。
2014年7月,苑琼丹在轻喜剧爱情电影《幸福从天而降》中饰老妈;同年出演网络电视剧《包笑公堂》,饰演苑皇后。
2015年与吴磊合作,出演网剧《仙剑客栈》
饰演婶婶。参演古装动作喜剧《毛驴县令》,饰演县令夫人;同年出演由徐峥自导自演的电影《港囧》,饰演多佳丽·樱桃小丸子。